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高产量收获:补料分批工艺强化的新方法

作者:瑞普利金(上海)生物科技有限公司 2019-08-08T00:00 (访问量:1912)

补料分批细胞培养需要进行澄清步骤,以收获产物,而不改变产物质量。在进行进一步的下游工艺及上样至昂贵的捕获层析柱之前,尽可能去除细胞碎片和固体物质非常重要,以提高层析柱的寿命及产物纯度。离心和深层过滤是当前标准的澄清技术,但其通常需要进行开放式操作,且设备占地较大。此外,此类多阶段工艺往往费时费力,难以规模放大,且可能影响蛋白质收率。‘

 

这里,我们介绍一种可放大的单步澄清方法,高产量收获(HPH),其是在补料分批培养中使用XCell ATF系统的新方法。与离心和深层过滤不同的是,HPH可实现整合式的澄清操作,同时维持细胞活性,并使蛋白质降解最小化。相比传统工艺,HPH已被证实可显著提高蛋白质生产。

在本案例研究中,在补料分批培养结束前4天,使用XCellTM ATF系统,以0.25、0.5和1.0 VVD的速度进行HPH。在此期间,灌流方法通过更新营养底物,去除毒性副产物,而可提高活细胞密度(VCD),并维持细胞活性>90%。在培养的最后一天,使用相同的XCellTM ATF系统从生物反应器收获剩余的蛋白质。结果显示,蛋白质产量可翻倍,细胞悬液被澄清,而不增加原补料分批的工艺时间。整个工艺在整合式、封闭且无生物负载的环境中以单步形式进行,获得可直接用于下游纯化的澄清产物。

 

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